關於腸病毒 (Enterovirus) (更新日期:2017/12/21)
l 腸病毒與鼻病毒 (rhinoviruses)
同屬於picornaviruses, 腸病毒包括:
1. Coxsackieviruses A1-A21, A24, 及 B1-B6
2. Echoviruses (enteric cytopathic human orphan viruses) 1-7, 9, 11-21, 24-27,
及29-33
3. Enteroviruses 68-71, 73-91, 及100-101
4. Polioviruses types 1-3
l 腸病毒可經由呼吸道的分泌物或腸道排泄物排出, 有時可存在於患者的血液或CSF中
參考資料:
l 腸道病毒（Enterovirus）又稱腸病毒，是一種主要寄生於腸道的RNA病毒，雖然名為腸病毒，在人類卻很少出現腸道的病狀。在病毒分類中，屬於第IV類的RNA病毒。腸道病毒的命名主要以它的英文名稱「Enterovirus」的英文簡寫「EV」，再後綴以數字命名。例如，近年在亞洲和北美洲流行、可以引起手足口病的EV71就是其中的一種。
l 腸病毒全球皆有分布，而人類是唯一宿主及唯一感染源。 腸病毒具高傳染性，主要經由兩途徑傳染
1.
經由吃到被汙染的食物、水、玩具、口水等
2.
經由呼吸道(飛沫、咳嗽 等)傳染
故為了避免被感染應經常正確洗手尤其吃東西前一定洗手、不吃生食、兒童玩具經常清洗與消毒、室內保持良好的通風環境、流行期間避免到公共場所、感染者盡量在家休息至少3-5天，都是預防腸病毒感染有效途徑。
l 大部分的腸病毒感染之臨床症狀都是輕微的類流感症狀，如發燒、喉痛、頭痛 、噁心 等，典型的皰疹型咽峽炎(herpangina)及手足口病(hand-foot-mouth disease)有時亦可見。
1.
皰疹型咽峽炎: 典型特徵為於咽峽部會出現潰瘍或小水泡。
2.
手足口病: 典型特徵為在手、腳、口腔有隆起紅疹與水泡。
l 大部分的腸病毒感染都屬於自限型疾病 (即病程發展到一個程度, 能自動停止, 只需症狀治療或不治療, 靠自身免疫力可自行痊癒) ，給予保守性的療法如控制發燒、疼痛及適當補充水分、足夠休息等即可控制病情。但少部分兒童尤其是五歲以下兒童，腸病毒感染可能會併發重症，尤其是感染腸病毒71型最多見，次為克沙奇病毒。故如有皰疹型咽峽炎或手足口病之特異症狀，又合併出現以下重症症狀時應儘速就醫：
1.
神經系統症狀包括嗜睡、意識改變、持續噁吐、肌躍型抽槒(myoclonic
jerk)、急性肢體麻痺症候群或其他腦炎、腦膜炎症狀。
2.
心肺系統症狀包括呼吸急促、呼吸困難、心跳過快、臉色蒼白、發紺、甚至心肺衰竭。
l 腸病毒的實驗室診斷:
n molecular
testing 分子檢測
n serotype
identification 血清型鑑定
n sequencing
定序
n virus
isolation 病毒培養
參考資料: CDC
l 培養腸病毒可以使用的細胞:
n primary
African green, cynomolgus or rhesus monkey kidney cells (AGMK, CMK, RMK)
n rhesus monkey kidney (LLC-MK2)
n African
green monkey kidney (Vero, BGMK, GMK)
n Madin Darby canine kidney (MDCK)
n human
diploid cells lines (MRC-5, WI-38, SF)
n human
embryonic kidney (HEK)
n human
embryonic fibroblast (HEF)
n human epithelial carcinoma (HEp-2)
n human rhabdomyosarcoma (RD)
腸病毒在不同的細胞株生長的能力差別很大, 因此如果可以至少使用三種以上的細胞株來接種, 比較能提高分離率
很多腸病毒能在RD細胞生長, 而Polio 及 coxsackie B viruses通常能在HEp-2上生長, 並產生CPE
WHO建議, 使用以下兩種細胞株可以提高polioviruses的分離率:
1.
L20B cells, a genetically engineered mouse cell line expressing the
human poliovirus receptor
2.
RD cells, derived from a human rhabdomyosarcoma
參考資料: CDC Enterovirus
Surveillance Guideline
腸病毒Enterovirus的螢光染色
腸病毒在RD細胞上的CPE是會變圓變小, 因此螢光染色上看到的RD細胞會很一致的小小的, 而且其螢光亮點是像芝麻在燒餅上一樣, 很均勻的分布在細胞上 , 不同的細胞會有不同的CPE, 其螢光染色的型態也會不同
如果看到細胞都是大大的, 那麼, 就有可能是偽陽性 (非特異性的螢光), 如果有些是很典型的小小的細胞, 另一些是變大的, 也有可能是同時感染了兩種病毒, 要特別注意一下其他細胞是否有不同的CPE
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| RD細胞上Pan -EV的螢光染色 |
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| RD細胞上Pan -EV的螢光染色 (紅色的是陰性的細胞) |
這些螢光不是點狀的, 有些呈塊狀, 而且很不均勻
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| 非特異性的螢光 |
這些亮點完全不在細胞上, 而且大小很不均勻
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| 非特異性的螢光 |
螢光不是均勻點狀的, 螢光亮度很低, 只是淡淡的綠色
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| 非特異性的螢光 (RD HSV染Pan EV) |
- Adenovirus (HEp-2細胞)如果染Pan-EV的螢光染色, 也可能出現非特異性的螢光亮點, 其亮點是成一小塊一小塊的, 並不是均勻的像芝麻點一樣分布在細胞上, 如下面幾張照片
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| Adenovirus (HEp-2細胞)染Pan-EV的螢光染色, 出現的非特異性的螢光亮點 |
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| Adenovirus (HEp-2細胞)染Pan-EV的螢光染色, 出現的非特異性的螢光亮點 (20X) |
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| Adenovirus (HEp-2細胞)染Pan-EV的螢光染色, 出現的非特異性的螢光亮點 |
Enterovirus在RD細胞上造成的CPE
Enterovirus在RD細胞上造成的CPE是變圓變小, 久了會變成細碎狀, 懸浮在培養液中
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| Enterovirus在RD細胞上造成的CPE |
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| Enterovirus在RD細胞上造成的CPE |
